%A 黄虞，杜冀晖，龚慧，王秀，王磊，李一凡 %T miR-92a调控KLF4表达影响结肠癌细胞增殖的机制研究 %0 Journal Article %D 2017 %J 国际肿瘤学杂志 %R 10.3760/cma.j.issn.1673-422X.2017.11.003 %P 812-818 %V 44 %N 11 %U {https://gjzlx.sdfmu.edu.cn/CN/abstract/article_10341.shtml} %8 2017-11-08 %X 目的探讨微小RNA92a（miR92a）靶向调控Krüppel样因子4（KLF4）对结肠癌细胞增殖的影响。方法采用实时荧光定量PCR（qRTPCR）方法检测21例结肠癌和对应癌旁正常组织及4种结肠癌细胞（HT29、SW480、SW620、HCT116）中miR92a的表达水平。选取结肠癌细胞株HCT116、SW620分别瞬时转染miR92a mimic、inhibitor，在构建miR92a高表达和抑制表达的细胞模型后，采用CCK8比色法检测细胞增殖活性，运用流式细胞仪检测细胞周期，采用Western blotting方法检测KLF4的蛋白表达水平，采用双荧光素酶报告基因检测细胞荧光素酶活性。结果结肠癌组织中miR92a的表达水平为（0.648±0.489）fmol/μg总RNA，显著高于对应癌旁正常组织的（0.064±0.062）fmol/μg总RNA，差异具有统计学意义（t=-5.420，P＜0.001）。4种人结肠癌细胞株中HCT116的miR92a表达水平相对最低，SW620的表达水平相对最高。上调miR92a表达，HCT116细胞72 h增殖活性高于阴性对照组（0.919±0.014∶0.765±0.025），差异具有统计学意义（t=-9.309，P=0.001），S期细胞增多［（41.670±0.461）%∶（38.703±0.554）%，t=-7.127，P=0.002］，KLF4蛋白表达水平下调（0.460±0.048∶0.758±0.109，t=22.865，P=0.028）；抑制miR92a表达，SW620细胞72 h增殖活性低于阴性对照组（0.608±0.011∶0.713±0.005），差异具有统计学意义（t=15.920，P＜0.001），S期细胞减少［（31.935±0.365）%∶（34.955±0.465）%，t=8.849，P=0.001］，KLF4蛋白表达水平上调（0.694±0.121∶0.479±0.044，t=-5.246，P=0.034）。miR92a3p mimic与KLF4 3′UTR野生型质粒共转染HCT116细胞后，与阴性对照组比较，上调细胞miR92a表达能使Firefly荧光素酶活性略有降低，但差异无统计学意义（t=0.878，P=0.429）。结肠癌组织中miR92a表达与KLF4蛋白表达之间有一定的负相关趋势，但无统计学意义（r=-0.163，P=0.699）。结论miR92a在结肠癌组织中高表达，可能通过促进细胞周期从G0G1期向S期转化而增强结肠癌细胞增殖能力。结肠癌细胞中高表达miR92a可能通过抑制KLF4蛋白表达发挥调控作用，但KLF4不是miR92a的直接作用靶基因。