betway必威登陆网址 (betway.com )学报››2021,Vol. 42››Issue (10): 739-743.DOI:10.3969/j.issn.2097-0005.2021.10.004
曹付威, 刘福林, 任莹莹, 陈文笙, 蒋美玲, 马敬傲, 范凯丽, 郭越生, 李欣然, 高艳霞()
出版日期:
2021-10-25发布日期:
2021-11-16通讯作者:
高艳霞作者简介:
曹付威,本科在读。基金资助:
Fuwei Cao, Fulin Liu, Yingying Ren, Wensheng CHen, Meiling Jiang, Jingao Ma, Kaili Fan, Yuesheng Guo, Xinran Li, Yanxia Gao()
Online:
2021-10-25Published:
2021-11-16Contact:
Yanxia Gao摘要:
利用正交试验法优化益母草二萜提取工艺,并探究其抑菌活性。
充分溶涨益母草后,采用加热回流法提取制备益母草二萜。以穿心莲内酯为对照品,采用紫外分光光度法测定益母草中总二萜的含量。首先对乙醇浓度、料液比、提取时间和提取次数进行单因素试验,考察其对二萜含量的影响;根据单因素试验结果,固定提取次数为3次,进行乙醇浓度、料液比、提取时间的L9(33)正交试验,优化益母草二萜提取工艺并验证。再用乙酸乙酯对浸提物进行萃取,使用不同比例的石油醚∶丙酮溶剂进行硅胶柱层析,初步得到益母草二萜粗提物。采用琼脂扩散法对其进行金黄色葡萄球菌和大肠杆菌抑菌实验研究。
益母草总二萜的最佳提取工艺为:乙醇90%、料液比1 g∶30 mL、提取时间2 h。经验证试验可知,该工艺的二萜含量平均为3.38%。硅胶柱层析洗脱剂石油醚∶丙酮的最佳比例为7∶3。该粗提物能明显抑制金黄色葡萄球菌的生长,对大肠杆菌则基本没有影响。
优化的提取工艺稳定高效益,能用于益母草二萜的提取,后续的抑菌试验说明益母草二萜具有抑菌活性,为进一步开发利用益母草奠定基础。
曹付威, 刘福林, 任莹莹, 陈文笙, 蒋美玲, 马敬傲, 范凯丽, 郭越生, 李欣然, 高艳霞. 益母草二萜类化合物的提取工艺及其抑菌活性[J]. betway必威登陆网址 (betway.com )学报, 2021, 42(10): 739-743.
Fuwei Cao, Fulin Liu, Yingying Ren, Wensheng CHen, Meiling Jiang, Jingao Ma, Kaili Fan, Yuesheng Guo, Xinran Li, Yanxia Gao. Eextraction technology of diterpenoids fromLeonurusjaponicasand its antimicrobial activity[J]. Journal of Shandong First Medical Unversity & Shandong Academy of Medical Sciences, 2021, 42(10): 739-743.
水平 | A乙醇浓度(%) | B料液比(g∶mL) | C提取时间(h) |
---|---|---|---|
-1 | 80 | 1∶25 | 1.0 |
0 | 90 | 1∶30 | 1.5 |
1 | 100 | 1∶35 | 2.0 |
表1因素与水平
水平 | A乙醇浓度(%) | B料液比(g∶mL) | C提取时间(h) |
---|---|---|---|
-1 | 80 | 1∶25 | 1.0 |
0 | 90 | 1∶30 | 1.5 |
1 | 100 | 1∶35 | 2.0 |
序号 | A | B | C | 二萜含量(%) |
---|---|---|---|---|
1 | -1 | -1 | -1 | 2.26 |
2 | -1 | 0 | 0 | 3.02 |
3 | -1 | 1 | 1 | 2.73 |
4 | 0 | -1 | 0 | 3.26 |
5 | 0 | 0 | 1 | 3.38 |
6 | 0 | 1 | -1 | 3.17 |
7 | 1 | -1 | 1 | 2.98 |
8 | 1 | 0 | -1 | 2.84 |
9 | 1 | 1 | 0 | 2.77 |
k1 | 2.67 | 2.83 | 2.76 | |
k2 | 3.27 | 3.08 | 3.02 | |
k3 | 2.86 | 2.89 | 3.03 | |
R | 0.60 | 0.25 | 0.27 |
表2正交试验设计与结果
序号 | A | B | C | 二萜含量(%) |
---|---|---|---|---|
1 | -1 | -1 | -1 | 2.26 |
2 | -1 | 0 | 0 | 3.02 |
3 | -1 | 1 | 1 | 2.73 |
4 | 0 | -1 | 0 | 3.26 |
5 | 0 | 0 | 1 | 3.38 |
6 | 0 | 1 | -1 | 3.17 |
7 | 1 | -1 | 1 | 2.98 |
8 | 1 | 0 | -1 | 2.84 |
9 | 1 | 1 | 0 | 2.77 |
k1 | 2.67 | 2.83 | 2.76 | |
k2 | 3.27 | 3.08 | 3.02 | |
k3 | 2.86 | 2.89 | 3.03 | |
R | 0.60 | 0.25 | 0.27 |
方差来源 | 偏差平方和 | 自由度 | 均方 | F | P |
---|---|---|---|---|---|
A | 0.56 | 2 | 0.28 | 5.80 | < 0.05 |
B | 0.10 | 2 | 0.05 | 1.03 | > 0.05 |
C | 0.14 | 2 | 0.07 | 1.46 | > 0.05 |
表3方差分析表
方差来源 | 偏差平方和 | 自由度 | 均方 | F | P |
---|---|---|---|---|---|
A | 0.56 | 2 | 0.28 | 5.80 | < 0.05 |
B | 0.10 | 2 | 0.05 | 1.03 | > 0.05 |
C | 0.14 | 2 | 0.07 | 1.46 | > 0.05 |
编号 | 含量(%) | 平均值(%) | RSD(%) |
---|---|---|---|
1 | 4.42 | 3.38 | 1.2 |
2 | 3.38 | ||
3 | 4.34 |
表4验证试验结果
编号 | 含量(%) | 平均值(%) | RSD(%) |
---|---|---|---|
1 | 4.42 | 3.38 | 1.2 |
2 | 3.38 | ||
3 | 4.34 |
菌种 | 益母草二萜 | 阳性对照 | 阴性对照 | 抑菌效果 |
---|---|---|---|---|
金黄色葡萄球菌 | 16.47 ± 0.38 | 23.01 ± 0.14 | 0 | 强 |
大肠杆菌 | 6.02 ± 0.17 | 12.53 ± 0.25 | 0 | 弱 |
表5益母草二萜抑菌效果/直径(mm)
菌种 | 益母草二萜 | 阳性对照 | 阴性对照 | 抑菌效果 |
---|---|---|---|---|
金黄色葡萄球菌 | 16.47 ± 0.38 | 23.01 ± 0.14 | 0 | 强 |
大肠杆菌 | 6.02 ± 0.17 | 12.53 ± 0.25 | 0 | 弱 |
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