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2025年 第46卷 第1期 刊出日期：2025-01-25

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肠道病毒研究专题

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基于单细胞测序的柯萨奇A16型病毒中和性单克隆抗体筛选

李静, 马传敏, 全传松, 李玉明, 张振杰, 史卫峰

2025, 46(1): 1-8. DOI: 10.3969/j.issn.2097-0005.2025.01.001

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目的通过单细胞测序筛选柯萨奇A组16型病毒（Coxsackievirus A16，CVA16）中和性单克隆抗体，并对其功能进行验证。方法以CVA16衣壳蛋白VP1作为抗原蛋白，流式细胞术分选VP1特异识别小鼠B细胞，对其进行B细胞抗原受体（B‐cell receptor， BCR）组库单细胞测序；基于测序数据分析IgG抗体轻重链序列，根据丰度排序筛选CVA16候选单克隆抗体并进行表达；利用酶联免疫吸附实验（enzyme‐linked immuno sorbent assay，ELISA）、微量中和实验等方法，对CVA16单克隆抗体进行体内外功能验证。结果成功表达CVA16-VP1-His重组蛋白，共免疫14只ICR小鼠，经流式分选出约50 000个存活VP1特异B细胞，单细胞测序构建BCR库，筛选并表达19株CVA16候选单克隆抗体。经验证单抗7-2、7-4、7-8、8-8及8-9具有中和作用，半数抑制率（half maximal inhibitory concentration，IC₅₀）分别为9.09、12.00、5.56、9.68、9.67 μg/mL。单抗7-8在体外细胞水平上具有较强的中和作用，在体内乳鼠攻毒保护实验中也表现出良好的中和效果。广谱性中和实验表明，单抗7-1具有针对EVA71病毒的中和能力，单抗7-5显示出针对CVA6病毒的中和能力。结论本研究成功建立了1种基于单细胞测序技术筛选CVA16单克隆抗体的方法，验证抗体7-8为1株具备较强中和活性的单克隆抗体。

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埃可病毒18型山东分离株遗传特征分析

刘棋, 徐险峰, 王敏, 邢薇佳, 史卫峰, 李娟

2025, 46(1): 9-16. DOI: 10.3969/j.issn.2097-0005.2025.01.002

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目的分析山东3株埃可病毒18型（echovirus 18，E18）分离株的遗传特征，探明E18病毒的进化规律。方法采集2019—2020年山东省手足口病患者和疱疹性咽峡炎患者的血清样本，通过病毒分离、荧光定量检测和高通量测序，共获得3株E18分离株及其全基因组序列；利用MEGA 11和Bioedit软件进行E18病毒株VP1基因和全基因组序列的系统发育分析，采用Simplot软件和RDP软件进行重组分析，研究E18病毒株的遗传特征。结果3株E18分离株基因组序列长度分别为7 367、7 347和7 383 bp，分离株间呈较高核苷酸相似性（97.92% ~ 98.31%）和氨基酸相似性（99.11% ~ 99.28%）；3株E18分离株VP1基因位于我国主要流行基因型C基因亚型C2分支中，与我国流行的多数毒株均位于全基因组系统发育树的Group D分支。重组分析表明，3株E18分离株均为基因重组株，毒株基因组P2和P3区约4 620 ~ 7 200位点间与国内E30流行株A86/YN相似性较高。结论E18毒株在我国多地持续流行，3株山东分离株同国内多数E18株的VP1基因和全基因组均位于同一进化分支，它们所在C2基因型为国内VP1基因流行亚型，全基因组Group D为国内优势流行分支。E18毒株在P2和P3区与E30发生潜在型间重组，对E18的遗传多样性研究具有参考意义。

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TRAF2在柯萨奇A组10型病毒感染细胞中的表达及作用

金翠宁, 徐扬, 成昕宇, 全传松, 李玉明, 刘绍琼

2025, 46(1): 17-23. DOI: 10.3969/j.issn.2097-0005.2025.01.003

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目的探讨TNF受体相关因子2（tumor necrosis factor receptor-associated factor 2，TRAF2）在柯萨奇A组10型病毒（coxsackievirus A10，CVA10）感染细胞模型和动物模型中的表达及其作用机制。方法将CVA10接种至非洲绿猴肾细胞（Vero 细胞）构建细胞模型，通过实时荧光定量PCR技术和Western blot技术检测核因子κB（nuclear factor kappa-B，NF-κB）和TRAF2 的表达水平；通过TRAF2过表达的CVA10感染细胞模型进一步验证其相互作用。同时，收集不同日龄ICR小鼠血液样本，检测TRAF2的表达；构建ICR小鼠CVA10感染模型，分析CVA10感染后，不同时间点的血清中TRAF2的含量变化。结果研究发现，CVA10感染细胞后，TRAF2的表达显著下降，NF-κB的磷酸化和总蛋白的水平明显提高；而在TRAF2过表达细胞模型中，CVA10的复制受到抑制，NF-κB的磷酸化和总蛋白的水平显著下降。正常小鼠在不同日龄血清中TRAF2的表达存在差异，从5天到8周龄呈现先上升后下降的趋势，而在CVA10感染小鼠模型中，同样发现TRAF2的表达显著下调。结论CVA10感染可激活NF-κB信号通路，而TRAF2通过NF-κB信号通路来参与调控CVA10病毒复制、感染细胞的过程。

基础研究

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基于网络药理学和体外实验探讨荷叶碱治疗弥漫大B细胞淋巴瘤的作用机制

周晓丽, 郭倩茜, 胡顺凤

2025, 46(1): 24-32. DOI: 10.3969/j.issn.2097-0005.2025.01.004

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目的探讨荷叶碱治疗弥漫大B细胞淋巴瘤（diffuse large B‐cell lymphoma，DLBCL）的核心靶点及作用机制。方法基于GeneCards数据库筛选DLBCL相关的靶基因，通过中药系统药理学数据库与分析平台（traditional Chinese medicine systems pharmacology，TCMSP），SwissTargetPrediction和PharmMapper网站检索荷叶碱相关的靶基因，取交集后进行富集分析。基于STRING平台进行蛋白质互作分析，利用Cytoscape筛选核心靶点并开展分子对接。细胞增殖实验检测荷叶碱处理后DLBCL细胞的增殖水平，流式细胞学实验检测加药后DLBCL细胞的周期阻滞水平和凋亡水平，Western blot检测其相关蛋白的表达水平。结果筛选出1 422个与DLBCL相关的靶基因和247个与荷叶碱相关的靶基因，取交集后共得到50个潜在基因。基因本体论（gene ontology，GO）富集分析、京都基因与基因百科全书（Kyoto encyclopedia of genes and genomes，KEGG）通路分析显示，潜在基因主要富集于细胞增殖、细胞周期、细胞凋亡等信号通路。随后构建“药物‐靶点‐通路‐疾病”的网络关系图。分子对接提示荷叶碱与核心靶点具有良好的结合活性，通过qRT-PCR进一步验证荷叶碱的表达调控作用。CCK‐8实验表明，荷叶碱可以抑制DLBCL细胞的增殖，且抑制作用呈浓度依赖性和时间依赖性。流式细胞学实验发现，荷叶碱以浓度依赖性的方式诱导DLBCL细胞在G2/M期阻滞，细胞凋亡率增加， 且具有浓度依赖性。Western blot结果表明，荷叶碱可降低DLBCL细胞中c‐MYC、Cyclin B1和CDK1的表达水平，升高cleaved‐PARP和cleaved‐caspase‐3的表达水平。结论荷叶碱可以通过调控细胞增殖、细胞凋亡、细胞周期等生物学过程，进而抑制DLBCL的发生、发展，为进一步探究荷叶碱治疗DLBCL的分子机制和临床应用提供了科学依据。

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基于Web of Science核心合集的老年友好型环境研究的可视化分析

洪子轩, 郭颖, 曹成霖, 曹文文, 陈任, 白忠良

2025, 46(1): 33-39. DOI: 10.3969/j.issn.2097-0005.2025.01.005

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目的通过相关文献的归纳和分析，探讨老年友好型环境研究的热点、前沿和发展趋势。方法收集并分析Web of Science核心数据库中发表的该领域相关文献，利用CiteSpace对文献进行可视化分析。结果共纳入96篇符合条件的文献，自2019年开始发文量呈现增长趋势。研究机构主要分布于欧洲发达国家，发文量最多的机构是弗罗茨瓦夫环境与生命科学大学。共形成10个关键词聚类，研究热点主要集中于老年友好型环境建设与规划、老年友好型环境对老年人的影响。结论老年友好型环境领域的研究仍处于起步阶段，国内学者应借鉴国外相关研究成果，推动跨机构、跨学科、跨区域的交流合作，进一步提升该领域研究的深度和广度。

病例报告

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乳腺腺样囊性癌1例并文献复习

宋镇秩, 刘文龙, 杨青

2025, 46(1): 40-43. DOI: 10.3969/j.issn.2097-0005.2025.01.006

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儿童食管瘘保守治疗8例并文献复习

陶倩, 魏绪霞, 徐俊杰

2025, 46(1): 44-46. DOI: 10.3969/j.issn.2097-0005.2025.01.007

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综述

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卒中后抑郁治疗的新进展

马腾, 李汉斌, 陈雯

2025, 46(1): 47-53. DOI: 10.3969/j.issn.2097-0005.2025.01.008

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卒中后抑郁（post‐stroke depression，PSD）是卒中患者最常见的神经精神并发症之一，发病率高达30%，对患者康复和生活质量都有显著负面影响。PSD发病机制复杂，涉及神经递质失衡、神经炎症反应、神经营养因子减少及下丘脑‐垂体‐肾上腺（hypothalamic‐pituitary‐adrena，HPA）轴功能异常等多种因素。治疗PSD的方法包括药物治疗、心理治疗、神经调节技术、中药治疗、运动疗法和社会经济支持等。药物治疗中，选择性5‐羟色胺再摄取抑制剂是首选，但需注意药物副作用；心理治疗如认知行为治疗（cognitive behavior therapy， CBT）和人际心理治疗（interpersonal psychotherapy， IPT）通过调整认知和改善人际关系来缓解症状；重复经颅磁刺激（repeated transcranial magnetic stimulation， rTMS）和经颅直流电刺激（transcranial direct current stimulation，tDCS）等神经调节技术显示出显著疗效；脑深部电刺激（deep brain stimulation， DBS）在难治性抑郁症中疗效较好，为PSD治疗提供参考。此外，脑机接口（brain‐computer interface，BMI）结合功能性电刺激（functional electrical stimulation，FES）在促进神经可塑性和功能恢复方面具有显著效果，中药和运动疗法也在改善PSD症状方面显示出潜力。影像学生物标志物在评估和优化治疗方案方面具有潜力。综合治疗策略结合多种方法，可为PSD患者提供更全面和有效的治疗方案。未来研究应继续探索这些方法的优化和个性化应用，以提高PSD患者的治疗效果和生活质量。本研究围绕PSD治疗的最新进展进行综述，为临床治疗PSD提供新思路和理论依据。

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术中静脉使用利多卡因的研究进展

周正, 王月兰

2025, 46(1): 54-57. DOI: 10.3969/j.issn.2097-0005.2025.01.009

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近年来，随着舒适化诊疗（comfort diagnostic and therapeutic procedure， CDTP）与医学人文理念不断发展，围手术期临床麻醉已逐渐形成多模式镇痛及低阿片化麻醉的趋向。术中静脉使用利多卡因可减少患者围手术期阿片类药物的暴露，降低恶心、呕吐、呼吸抑制等不良反应的发生风险，是加速康复外科（enhanced recovery after surgery，ERAS）发展的需要。本研究从药理学及代谢机制着手，归纳了近期术中静脉使用利多卡因的研究，从多模式镇痛角度综述了不同类型患者利多卡因静脉注射的利与弊。

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孕中期单绒毛膜双胎妊娠的选择性减胎：不同技术的系统评价

刘彦, 姚丙帅, 李磊

2025, 46(1): 58-64. DOI: 10.3969/j.issn.2097-0005.2025.01.010

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近年来，由于各种辅助生殖技术的发展，多胎妊娠的发生率迅速上升，多胎妊娠与死产风险和新生儿死亡风险也相应增加。多胎妊娠主要包括单绒毛膜双胎妊娠、双绒毛膜双胎妊娠，主要并发症包括双胎输血综合征、选择性胎儿生长受限、动脉反向灌注序列、贫血多血质序列征。有时必须考虑选择终止其中一个胎儿，以尽可能地减少对另一个胎儿的风险或增加胎儿存活的机会，选择终止受影响的胎儿对健康胎儿有利。目前有多种减胎技术在临床中应用使胎儿围生期、生存期延长，新生儿并发症（脑损伤和神经发育障碍）的发生率降低。分析比较射频消融术、微波消融术、脐带血管双极凝固、脐带血管双极凝固、高强度聚焦超声刀等选择性减胎后复杂单绒毛膜妊娠的围产儿结局。结果发现，不同减胎技术各有优点，并且各自的适应证不同。双胎并发症为选择性胎儿生长受限时，可优先考虑行射频消融术减胎治疗，且其Ⅱ型比Ⅲ型的存活率高；双胎并发症为动脉反向灌注序列时，可优先考虑微波消融治疗，且与降低早产风险有关。目前，高强度聚焦超声刀也在逐步应用于动脉反向灌注序列的治疗。由于脐带结扎所致的早产率与死亡率较高，正在逐步减少应用。