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2021年 第42卷 第9期    刊出日期：2021-09-25

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基础研究

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肠道病毒71型 VP1蛋白原核表达及在高通量抗体筛选中的应用

崔珂, 孔亚茹, 马传敏, 张振杰, 史卫峰, 全传松

2021, 42(9):  641-644.  DOI: 10.3969/j.issn.2097-0005.2021.09.001

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肠道病毒71型（enterovirus 71，EV71）是引起重症手足口病的主要病原体，目前缺少有效的抗病毒药物。本研究利用EV71 VP1蛋白作为抗原，筛选免疫小鼠脾脏特异性表达EV71抗体的B细胞。

将EV71 VP1 基因进行密码子优化，构建至pET-21a（+）表达载体，并转化到大肠埃希菌BL21-DE3，优化蛋白表达和复性条件，经SDS-PAGE和Western blot鉴定表达，并检测其抗原性；以纯化蛋白为抗原，通过流式细胞术对灭活病毒免疫小鼠的B淋巴细胞进行分选，用于单克隆抗体的制备。

EV71 VP1基因在大肠埃希菌中以包涵体形式稳定表达，纯化复性后的蛋白具有良好的免疫原性；利用表达的VP1蛋白从免疫和未免疫的昆明小鼠脾脏筛选出能够特异性表达EV71抗体的B细胞，两者数量差异具有统计学意义。

成功获得免疫原性良好的EV71 VP1重组蛋白?，与流式细胞术结合可用于EV71特异B细胞的检测和分选。

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Nrf2激活剂CDDO-EA抑制蛛网膜下腔出血后神经功能损伤及促进小胶质细胞M2型转化

董其威, 赵华阳, 任世浩, 张朋杰, 侯亚军, 毛蕾蕾

2021, 42(9):  645-650.  DOI: 10.3969/j.issn.2097-0005.2021.09.002

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探讨新型核因子2相关因子 （NFE2 related factor 2， Nrf2）的激活剂CDDO-EA对小鼠蛛网膜下腔出血（subarachnoid hemorrhage，SAH）后神经功能缺损及小胶质细胞极化的影响。

应用大脑中动脉穿刺法制作SAH模型，术后72 h进行神经功能评分，随后处死小鼠并留取脑组织进行冰冻切片，采用免疫荧光双标染色CD206/Iba1标记M2型小胶质细胞。

术后48 h收集各组动物大脑皮层做Western blot检测CDDO-EA表达量，结果表明，50 μg及100 μg CDDO-EA处理组脑内Nrf2表达量较PBS对照组均明显增加（P < 0.05）。我们采用50 μg最佳剂量治疗SAH小鼠，术后72 h对各组动物进行神经功能评分，结果表明SAH模型小鼠具有明显的神经功能障碍，而给予CDDO-EA治疗后神经功能有所改善（P < 0.05）。另外，CDDO-EA治疗后大脑皮层及海马M2型小胶质细胞比Vehicle对照组明显增多。

CDDO-EA治疗蛛网膜下腔出血能够有效改善神经功能，很有可能是通过上调Nrf2表达促进小胶质细胞向M2型转化实现的。

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干扰UCP2保护H9C2心肌细胞免受缺氧诱导的细胞凋亡并抑制细胞自噬

张莉, 李峰, 刘悦雁, 王艳梅, 章辰琛

2021, 42(9):  651-656.  DOI: 10.3969/j.issn.2097-0005.2021.09.003

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研究干扰解偶联蛋白2（uncoupling protein 2，UCP2）表达对缺氧诱导的细胞凋亡及自噬的影响。

通过RT-qPCR检测缺氧后H9C2心肌细胞UCP2表达水平，活性氧簇（reactive oxygen species，ROS）荧光实验检测干扰UCP2对细胞内ROS水平的影响，通过流式细胞实验检测细胞凋亡率，通过蛋白免疫印迹实验进一步检测干扰UCP2对cleaved-caspase 3的影响，并通过ELISA检测细胞损伤相关因子：乳酸脱氢酶（lactate dehydrogenase，LDH）、肌酸激酶（creatine kinase，CK）、白细胞介素-6（interleukin-6，IL-6）和肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α，TNF-α），最后检测细胞自噬相关因子：膜型LC3/胞浆型LC3（LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ）、自噬基因Beclin-1以及p62的表达水平。

缺氧环境下H9C2细胞中UCP2的表达量明显升高，干扰UCP2表达可以降低缺氧引起的细胞内ROS水平升高。干扰UCP2表达可以降低缺氧环境下H9C2细胞凋亡率，并且降低LDH、CK、IL-6和TNF-α的表达水平。在蛋白免疫印迹实验中，干扰UCP2表达可降低LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ和Beclin-1表达，并增加p62的表达水平。

干扰UCP2可降低缺氧引起的细胞内ROS水平，并抑制缺氧引起的细胞凋亡及自噬。

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活血软坚通络方对大鼠冠脉微血管血栓及内皮损伤因子水平的影响

张萌, 李明, 张莉, 张明, 苗鑫, 李元民

2021, 42(9):  657-661.  DOI: 10.3969/j.issn.2097-0005.2021.09.004

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研究中药活血软坚通络方对大鼠冠状动脉微血管血栓及内皮损伤因子水平的影响。

将60只健康Wistar大鼠，采用随机数字表法分成模型组、尼可地尔组、中药组、假手术组（对照组）。模型组选择向大鼠左心室注射月桂酸钠建立大鼠冠状动脉微血管血栓及内皮损伤动物模型，用药干预组分别给予尼可地尔1.5 mg·（kg·d）^－1、中药15 g·（kg·d）^－1，假手术组、模型组给予等量的蒸馏水灌服。28天后观察大鼠心肌切片病理改变及冠状动脉微血管血栓阻塞情况，并检测血清前列腺素Ⅰ₂（PGI₂）、血栓素A₂（TXA₂）。

与假手术组比较，造模各组经左心室注射月桂酸钠导致冠脉微血管血栓形成及心肌病理损伤；用药28天，与模型组比较，中药组可减轻微血管栓塞，改善心肌病理损伤，增加PGI₂，减少TXA₂；与尼可地尔组相比，中药组在改善微血管血栓及减轻内皮损伤因子方面未见明显差别。

利用月桂酸钠造模可引起大鼠冠脉微血管血栓形成及内皮损伤；中药组可减轻冠脉微血管栓塞并改善微血管病变内皮功能；与尼可地尔组相比，中药组未见明显优势。

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富氢水缓解5-FU诱导的大鼠口腔粘膜溃疡

张单雅, 薛俊莉, 刘伯言, 陶鸽如, 石运芝, 秦树存

2021, 42(9):  662-666.  DOI: 10.3969/j.issn.2097-0005.2021.09.005

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评估饮用富氢水对化疗药物5-氟尿嘧啶（5-FU）诱导口腔粘膜溃疡的缓解效果和可能的生物学作用。

雄性SD大鼠连续2日腹腔注射5-FU（0.05 mg/g），第3日应用NaOH颗粒或20%乙酸接触颊部粘膜建立口腔溃疡模型，第5日给予实验大鼠饮用富氢水，于第10日处死动物取材。统计实验组大鼠存活率，观察口腔粘膜损伤情况，并使用Image J软件测量溃疡面积，ELISA法检测大鼠血清中TNF-α、IL-6、IL-1β的水平，免疫组织化学法检测颊粘膜中TNF-α、IL-6和iNOS的表达。

饮用富氢水可提高实验组大鼠存活率；NaOH颗粒制造的溃疡，损伤面积大于注射20%乙酸造成的溃疡损伤，但饮用富氢水对溃疡损伤面积的影响差异无统计学意义（P > 0.05）。模型组大鼠血清中TNF-α、IL-6、IL-1β的含量均高于对照组，富氢水组较模型组有下降趋势但仅20%乙酸模型组IL-1β与对照组比较差异有统计学意义，余差异均无统计学意义。颊粘膜中TNF-α和IL-6在健康对照组中的表达较弱，在模型组中的阳性着色见于颊粘膜上皮细胞和炎性间质中；富氢水组的阳性着色较模型组减弱；iNOS在实验组颊粘膜中的阳性表达较少。

氢分子可能通过抑制氧化应激相关炎症反应，减轻5-FU诱导的大鼠口腔粘膜溃疡。

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口腔鳞癌Survivin表达及其在血管生成中的作用

李腾宇, 张霞, 于肖鹏, 李晓光, 王西冉, 王延秀, 刘焕燕

2021, 42(9):  667-669.  DOI: 10.3969/j.issn.2097-0005.2021.09.006

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研究口腔鳞癌（oral squamous cell carcinoma，OSCC）中生存素（Survivin）的表达及其在血管生成中的作用。

采用免疫组织化学方法，检测OSCC标本中Survivin、环氧化酶-2（COX-2）、血管内皮生长因子（VEGF）及CD34的表达，并测定其微血管密度值（MVD）。SPSS22.0软件行统计学分析。

106例OSCC组织中，Survivin与COX-2、VEGF表达明显相关（P < 0.05）。Survivin阳性组MVD值高于阴性组（P < 0.01）。

Survivin促进了OSCC组织的血管生成，COX-2和VEGF参加了其作用。

临床研究

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早产儿DEHSI与PVL对脑发育成熟度的影响

班耀丹, 徐萌, 靳京, 马得廷

2021, 42(9):  670-674.  DOI: 10.3969/j.issn.2097-0005.2021.09.007

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应用总体发育成熟度评分（TMS）评价早产儿中重度脑白质弥漫性过度高信号（DEHSI）和脑室周围白质软化症（PVL）对脑发育成熟度的影响。

回顾性分析68例新生儿颅脑MR图像，分为三组：正常早产儿组、DEHSI组和PVL组（校正胎龄为37 ~ 44周），利用TMS对每个新生儿颅脑MR图像进行评价，比较各组之间的TMS得分。

正常早产儿组在髓鞘形成、皮质卷曲、TMS总分方面得分与DEHSI早产儿组之间的差异具有统计学意义（P < 0.05）；在髓鞘形成、皮质卷曲、TMS总分得分中，由高到低依次为正常早产儿组、PVL患儿组、DEHSI早产儿组；任意两组间在生发基质方面和移行细胞带方面得分的差异无统计学意义（P > 0.05）。

脑白质存在DEHSI和PVL可以影响早产儿的大脑发育成熟度，二者对大脑发育成熟度的影响程度不同。DEHSI会延迟大脑的发育成熟度。

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外周血NLR、PLR、SII在甲状腺结节中的诊断价值

房忠卫, 周宪伟, 曹志强, 宋艳芳, 任更朴

2021, 42(9):  675-679.  DOI: 10.3969/j.issn.2097-0005.2021.09.008

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探讨外周血中性粒细胞/淋巴细胞比值（NLR）、血小板/淋巴细胞比值（PLR）以及系统性免疫性炎症指数（SII）在健康人群，甲状腺良性、恶性结节间的鉴别诊断价值。

选取2017年1月至2019年10月在聊城市第二人民医院确诊的172例甲状腺良性结节及285例恶性结节患者作为研究对象，选取同期该院健康查体199例患者作为对照组，记录术前外周血中性粒细胞计数、淋巴细胞计数以及血小板计数，并计算NLR、PLR、SII，用t检验比较NLR、PLR、SII在健康人群组、良性结节组、恶性结节组间的差异，用受试者工作特征曲线（ROC曲线）确定NLR、PLR、SII在不同组别中鉴别的临界值。

除NLR和SII在良恶性结节组比较中差异无统计学意义外，三项指标（NLR、PLR、SII）在其他三组两两比较中，差异均具有统计学意义（P < 0.05）。AUC面积在0.72～0.8之间。NLR、PLR、SII检测在健康人群与良性甲状腺结节人群鉴别中灵敏度分别为85.9%，92.5%，81.9%，在健康人群与甲状腺恶性结节组鉴别中灵敏度分别为70.4%，81.9%，74.1%，在良性结节组与恶性结节组的鉴别特异度分别为85.6%、69.5%，83.2%，差异具有统计学意义。

NLR、PLR、SII检测对健康人群与良性结节组以及健康人群与甲状腺结节组具有一定的鉴别价值，对良性结节与恶性结节的鉴别意义不明显。

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苏州市吴江地区妊娠期血脂参考值范围的探讨

张旭, 杨鸿林

2021, 42(9):  680-684.  DOI: 10.3969/j.issn.2097-0005.2021.09.009

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观察苏州市吴江地区妊娠不同时期血脂水平分布情况，建立本地区的参考范围。

将在我院建册系统检查至足月分娩的单胎妊娠1388例孕妇作为研究对象，通过对孕11～13⁺⁶周，孕28～31⁺⁶周，孕35～36⁺⁶周，孕38～41⁺⁶周四个不同孕期的血液中甘油三酯、总胆固醇、低密度脂蛋白和高密度脂蛋白的检查结果进行统计分析，初步建立本地区妊娠各时期孕妇血脂的参考范围。

妊娠期血脂水平会随孕期逐渐升高，孕中后期明显超过非孕期水平。

妊娠期的血脂不适合用非孕期的参考标准进行分析与管理，本研究以百分位数法划定本地区正常值参考范围，供临床医师对妊娠不同时期血脂结果进行合理解读。

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乌灵胶囊联合黛力新治疗脑卒中后抑郁有效性和安全性的Meta分析

焦敏, 苗帅, 徐晓燕

2021, 42(9):  685-690.  DOI: 10.3969/j.issn.2097-0005.2021.09.010

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系统评价乌灵胶囊联合黛力新治疗脑卒中后抑郁（post-stroke depression，PSD）的有效性和安全性，为预防PSD药物的临床应用提供参考。

计算机检索CNKI、VIP、WanFang、PubMed等数据库中关于乌灵胶囊联合黛力新治疗脑卒中后抑郁的随机对照实验（RCT），截止日期为2020年9月。由2名研究者通过独立甄别文献、提炼资料并综合评价纳入研究的偏倚风险后，采用Revnew5.3软件对多项结果进行Meta分析。

共被纳入23篇RCTs文献，包括2059例患者（试验组1033例，对照组1026例）。Meta分析结果显示，试验组治疗PSD患者的总有效率比对照组高且差异具有统计学意义（RR = 1.19， 95%CI：1.14～1.24，P < 0.01）；试验组对降低PSD患者的汉密尔顿抑郁量表（HAMD）评分高于对照组且差异具有统计学意义（MD=－4.74，95% CI：－5.13～－3.75，P < 0.01）；试验组对降低PSD患者的神经功能缺损评分量表（NIHSS）评分高于对照组且差异具有统计学意义（MD = －2.33，95% CI：－3.63～－1.02，P < 0.01）；试验组对升高PSD患者的Barthel 指数（BI）评分高于对照组且差异具有统计学意义（MD = 7.09，95% CI：4.78～9.41，P < 0.01）；试验组的不良反应发生率明显比对照组低且差异具有统计学意义（RR = 0.54，95% CI：0.41～0.70，P < 0.01）。

乌灵胶囊联合黛力新相比于黛力新能够显著地提高其在治疗PSD中的疗效，改善神经机能和日常生活能力，且副作用更小。

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蔬菜摄入与肝癌风险关系的Meta分析

朱席, 王秀

2021, 42(9):  691-696.  DOI: 10.3969/j.issn.2097-0005.2021.09.011

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探讨蔬菜摄入量与肝癌发生风险的关联性，为疾病的预防提供科学依据。

系统检索2020年11月前国内外公开发表的有关蔬菜摄入量与肝癌风险的病例对照和队列研究，合并分析其最高摄入水平与最低水平之间肝癌发病风险的效应值及95%CI。采用Stata 11.0和Revman 5.3软件进行统计分析。

研究共纳入12个病例对照研究和9个队列研究，共涉及1 961 683名受试者和5023名肝癌患者。食用蔬菜对肝癌的预防有显著的保护作用［RR = 0.68，95% CI （0.56，0.82），P < 0.01］。在亚组分析中各分层均显示摄入蔬菜可降低肝癌的风险。Begg′s检验（P = 0.124）和漏斗图提示未见发表偏倚。

研究结果表明，较高的蔬菜摄入量可以降低肝癌的发生风险。还需要更多更大样本量的前瞻性研究，以及良好的混杂因素控制来进一步评估。

公共卫生与管理学

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基于合肥市两社区的社会资本在中老年人体型认知中的作用

侯芳芳, 张燕, 王劲东, 缪丹丹, 沈国栋

2021, 42(9):  697-701.  DOI: 10.3969/j.issn.2097-0005.2021.09.012

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对自身体型的正确认知是采取减重等健康促进行为的前提，本研究旨在调查城市中老年人对自身体型的认知（即自我判断与实际测量的一致性），并基于社会资本理论，探索社会资本在城市中老年人体型认知中的作用。

通过方便抽样选取合肥城市社区中老年人722名，设计问卷收集调查对象人口学特征、个人认知以及各类型社会资本（纽带型、桥接型以及连接型）指标信息，并在身体测量的基础上分析研究对象自我评估体型和实测体型的一致性，采用二元Logistic回归法分析社会资本在中老年人群自我体型认知中的作用。

研究对象自我报告“偏瘦”的比例高于实际水平，而“超重”和“肥胖”的比例低于实测水平，男性和女性自我报告体型与实测体型一致性一般。二元 Logistic 回归分析显示，纽带型社会资本对中老年人体型认知影响较大，其中研究对象的家人“希望自己更胖一点”（OR：2.065，95%CI：1.250 ~ 3.411）和“不太关心”（OR：1.775，95%CI：1.099 ~ 2.865）会导致中老年人错误认知的可能性上升，而与朋友见面频率较高则中老年人错误认知的可能性下降（OR：0.660，95% CI：0.444 ~ 0.979），桥接型社会资本对中老年人体型认知也有显著影响，缺乏社区或家庭医生宣教增加中老年人错误认知的可能性（OR：1.431， 95%CI：1.010 ~ 2.028）。

城市社区中老年人易处于“超重或肥胖而不自知”的状态，纽带型和桥接型社会资本影响其对自身体型的正确判断，而连接型社会资本无明显影响。今后应加强对中老年人的体重管理，并可从社会资本的角度入手进行干预，正确引导其家人态度，并鼓励中老年人参加社交活动。

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基于时空角度的我国卫生筹资结构现状

韦苏晴, 王若薇, 田婷婷, 单莹, 时涛, 李士雪

2021, 42(9):  702-705.  DOI: 10.3969/j.issn.2097-0005.2021.09.013

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从时间和空间角度对2014—2018年中国内陆31个省级行政区域卫生总费用的筹资水平和结构进行分析，探讨地域差异。

分析我国卫生筹资水平和结构的纵向变化情况，同时运用ArcGIS10.2软件对31个省级行政区域的卫生筹资结构数据进行空间自相关分析。

2014—2018年间我国卫生筹资水平不断提高，筹资结构不断优化，但省际差异依旧明显。

未来我国卫生工作重点仍然是提升卫生筹资水平，优化筹资结构，重点关注卫生筹资结构的地域差异，从而解决卫生筹资的不公平性。

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一起原因不明食源性疾病暴发事件调查检测分析

陆娟娟, 李爱英, 郑金华, 宋浩

2021, 42(9):  706-708.  DOI: 10.3969/j.issn.2097-0005.2021.09.014

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通过对泰安市泰山景区一起食源性疾病暴发事件调查分析，排查引起暴发原因，为做好此类食源性疾病事件的处置提供借鉴。

收集事件病例资料，开展流行病学调查，对食品留样及环境标本进行病原体培养分离及分子生物学鉴定等实验室检测，并对事件进行分析。

在黄前中学食堂就餐后，58名学生发病，表现为腹痛（86.21%，50/58）、腹泻（53.45%，31/58）、恶心（17.24%，10/58）症状，部分病人使用抗生素治疗后，明显好转。4份食品样本中检出阴沟肠杆菌，其他样品均未检出致病菌、条件致病菌，诺如病毒、新冠病毒检测均为阴性。12份病人双份血清与食品中检出的阴沟肠杆菌菌液均不凝集。

本次事件结合流行病学特点、临床症状和实验室诊断资料，认定是一起原因不明的食源性疾病暴发事件，建议食品监管部门应加强校园内的监督和管理，避免同类事件再次发生。

病例报告

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腹膜后巨大脂肪肉瘤1例报道

刘欢, 杨斌, 孙象军

2021, 42(9):  709-711.  DOI: 10.3969/j.issn.2097-0005.2021.09.015

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首次妊娠抗-E、c不规则抗体引起新生儿溶血1例

张振华, 杨义娟, 林妙惠, 解梅琳

2021, 42(9):  711-712.  DOI: 10.3969/j.issn.2097-0005.2021.09.016

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综述

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腺苷与癫痫发病机制研究

戚孟琪, 吕玉芹, 徐雯, 张敬军

2021, 42(9):  713-716.  DOI: 10.3969/j.issn.2097-0005.2021.09.017

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癫痫是神经系统常见病之一。近年来，关于脑腺苷的合成过程、代谢途径、功能及腺苷与癫痫的发病机制及治疗是国内外研究热点之一。本文对研究进展进行综述。

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分子氢与自噬和氧化应激

张坷平, 谷竞龙飞, 焦剑桥, 刘欣然, 苑方硕, 张丽, 李金国, 张昭强

2021, 42(9):  717-720.  DOI: 10.3969/j.issn.2097-0005.2021.09.018

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分子氢是一种强还原性物质，具有选择性抗氧化作用，能够清除组织中多余的活性氧物质（reactive oxygen species， ROS），此外还具有抗炎、抗凋亡、调节自噬等作用。自噬与氧化应激关系密切，应用分子氢可以调控氧化应激与自噬之间的平衡，调节自噬相关变化，降低ROS水平，进而维持细胞内稳态。本文对相关内容进行简要综述，以期为后续研究提供参考。